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液相色譜儀為什么會出現峰分叉?

點擊: 1620次 時間:2022-02-14 10:53

液相色譜儀出現峰分叉可能有以下幾方面原因:

1、色譜柱污染

在開始時沒問題,在使用一段時間后出現這個問題,可能是由于污染引起的。這時需要對色譜柱加強沖洗,即使用比方法流動相更強的溶劑沖洗色譜柱。

2、保護柱失效

如果樣品基質比較臟,使用一段時間之后,發現的峰分叉或拖尾等問題,很有可能是保護柱失效造成的。一般粗略判斷標準,塔板數、壓力或分離度的改變超過10%,就需要更換保護柱了。保護柱是消耗品,建議直接更換,不需要再生。

3、接頭連接不正確

如果色譜柱在使用過程中發現每個峰的峰形都出現問題,先考察是否有連接問題。管線可能太長或太短,這種情況可能導致滲漏或峰分叉/拖尾。如果管線太長,密封圈位置不當,將發生滲漏。如果管線推出的距離不夠,將會產生一段死空間,形成混合腔,導致柱外體積,使峰形變壞。

4、溶劑效應

在反相LC中、如使用10O%有機溶劑或10O%強溶劑,大體積進樣時,將使色譜峰過早洗脫出色譜柱,導致峰變形。進樣溶劑改為用水稀釋,與流動相更為兼容,即使進樣體積較大也不會出現峰變形。較早流出的峰或靠近溶劑前沿的峰更容易出現拖尾。在液相色譜中用溶于流動相的小體積進樣最為理想。

5、樣品過載

當進樣量超過柱子的容量,樣品峰會呈現分叉或拖尾,解決方案就是減少進樣量。

6、色譜柱塌陷

由于柱塌陷引起的峰分叉,很難修復。如果流動相pH>7或在色譜柱pH耐受圍臨界點附近長時間使用,是比較容易造成硅膠填料溶解塌陷。如果出現色譜柱塌陷,您會看到色譜圖中的每個峰峰形都會發生變化(峰拖尾、加寬或分叉),短時間內可以反方向運行,建議直接更換色譜柱。日常使用的過程中注意將溫度降低到40℃以下,特別是使用高pH流動相時。

7、柱前篩板部分堵塞長期分析臟樣品

如果沒有保護柱或在線柱前過濾器,顆粒物和強吸附物很可能在柱入口篩板發生堵塞,同時伴隨著壓力升高,解決辦法一般是色譜柱反沖。

8、色譜柱性能下降

使用色譜柱時,會用其分析各種目標物、使用各種流動相并分離不同的樣品基質,經過長時間的使用,色譜柱會受到這些物質的影響發生一些微妙的變化,從而引起峰分叉、拖尾或保留時間的改變。

(內容來源儀器信息網)




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